小鼠胰腺上皮細胞的分離培養(yǎng)及鑒定

【簡介】

上皮細胞覆蓋于身體表面并襯貼于體內空腔器官腔面的細胞，上皮細胞具有強大的角生和更新能力。上皮組織具有保護、吸收、分泌和排泄等作用。當上皮細胞受損時，則影響機體的防御功能；胰腺的內分泌物主要有胰島素、胰高血糖素、胃泌素及生長抑素等，與機體內的營養(yǎng)代謝及調節(jié)有關；

【材料】

動物：2-20周齡C57BL/6J小鼠；

器械耗材：手術剪、手術鑷、 15ml離心管試劑、75%酒精、DMEM、雙抗、PBS、膠原酶、胰蛋白酶、上皮專用培養(yǎng)液；

【方法】

膠原酶聯(lián)合胰酶消化法

1）鼠脫頸，取出胰腺組織，剪碎，PBS清洗；

2）組織碎塊加入混合酶進行消化，組織消化完后收集細胞懸液；

3）細胞懸液離心，收集沉淀，再用PBS重懸離心；

4）上皮專用培養(yǎng)液種細胞，37℃,5co2，48小時首換液；

【培養(yǎng)】

上皮細胞專用培養(yǎng)液；

【鑒定】

1）免疫熒光陽性：角蛋白18（Cytokeratin 18）