成軟骨鑒定試劑盒(阿利新藍—核固紅染色法)
實驗原理
阿爾新藍,是一種大分子共軛染料,類銅鈦花青染料,起初用于紡織纖維染色。這種陽離子染料與酸性基團結合,形成不溶于水的復合物。阿爾新藍由含銅的酞菁環(huán)與四個異硫脲基通過硫醚鍵相連而成。該異硫脲基呈中度堿性,使阿爾新藍帶陽離子。阿爾新藍使碳水化合物著色的確切機制不明,普遍認為是陽離子的異硫脲基通過靜電與組織內的多聚陰離子相連。阿爾新藍不能沉淀糖原,但在pH2.5時,阿爾新藍可以與結締組織和軟骨中的蛋白多糖/透明質酸以及上皮酸性黏蛋白發(fā)生反應。從而用來鑒定成軟骨形成,染色結果會使得結締組織以及軟骨中的蛋白多糖及酸性粘蛋白呈鮮藍綠色,經過核固紅染液染色后的細胞核呈紅色。
試劑盒組分
組分名稱 |
C02002-1 |
C02002-2 |
阿爾新藍染色液 |
10ml |
20 |
核固紅染色液 |
10ml |
20 |
3%醋酸溶液 |
15ml*2 |
30ml*2 |
操作步驟
1. 石蠟切片脫蠟至蒸餾水洗數次;
2. 用3%醋酸水溶液洗滌;
3. 阿爾新藍染液染10-30分鐘;
4. 3%醋酸水溶液洗滌,吸水紙吸干;
5. 核固紅染色液染細胞核2-3分鐘
6. 水洗,常規(guī)脫水,透明,中性樹膠封固。
7. 4℃避光保存12個月。