核酸蛋白互作(RNA/DNA pull down、CHIRP-MS)服務(wù)
(DH1008)
一、服務(wù)介紹
核酸蛋白互作(RNA/DNA pull down、CHIRP-MS)用于目的RNA或DNA的互作蛋白驗(yàn)證或篩選,這三種技術(shù)是捕獲RNA/DNA-蛋白復(fù)合體的*常用方法,結(jié)合western-blot實(shí)驗(yàn)可以驗(yàn)證某種蛋白是否與目的RNA/DNA互作,結(jié)合質(zhì)譜技術(shù)可以高通量鑒定與RNA/DNA結(jié)合的目的蛋白。
RNA/DNA pull down是研究體外條件下RNA或DNA與蛋白互作的重要技術(shù)。該技術(shù)通過(guò)體外轉(zhuǎn)錄目的RNA的一部分或全長(zhǎng),用生物素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,再與鏈霉親和素磁珠孵育使之固定在磁珠上,用以“pull down”互作蛋白,純化的產(chǎn)物蛋白經(jīng)特定抗體的western-blot實(shí)驗(yàn),可驗(yàn)證某種蛋白與目的RNA/DNA是否有相互作用;純化的蛋白經(jīng)質(zhì)譜鑒定,即可篩選到與目的RNA結(jié)合的蛋白。
CHIRP-MS是研究體內(nèi)條件下RNA與蛋白互作的技術(shù)。該技術(shù)在特定時(shí)間點(diǎn)用甲醛交聯(lián)等方式固定細(xì)胞內(nèi)RNA與蛋白及核酸的互作復(fù)合物,再利用生物素標(biāo)記的探針及鏈霉親和素磁珠純化出與RNA結(jié)合的蛋白及核酸的復(fù)合物,分離產(chǎn)物中的蛋白質(zhì)做質(zhì)譜鑒定,即可篩選出與目的RNA結(jié)合的蛋白。
二、服務(wù)內(nèi)容及價(jià)格
服務(wù)編號(hào) |
服務(wù)內(nèi)容 |
服務(wù)價(jià)格 |
服務(wù)周期(工作日) |
DH1008-1 |
RNA pull down服務(wù) |
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DH1008-2 |
DNA pull down服務(wù) |
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DH1008-3 |
CHIRP-MS服務(wù) |
咨詢 |
咨詢 |
三、客戶提供
1、目的基因、目的蛋白信息。(包括物種、序列或者ID,保密文件除外)
2、細(xì)胞株及培養(yǎng)信息
3、待測(cè)蛋白信息及檢測(cè)所用蛋白抗體
4、相關(guān)文獻(xiàn)(可選)。
四、服務(wù)流程
1)載體構(gòu)建GST-靶蛋白融合表達(dá)載體
2)GST-靶蛋白表達(dá)
3)WB檢測(cè)蛋白融合情況
4) 細(xì)胞裂解,獲取總蛋白裂解液
5) GST-pull down調(diào)取互作結(jié)合蛋白
6) 蛋白純化
7) 數(shù)據(jù)分析及Result Figure處理
五、提交給客戶結(jié)果
1、原始數(shù)據(jù)、結(jié)果圖片(包括Input、陽(yáng)性及陰性對(duì)照結(jié)果);
2、標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)報(bào)告(包括詳細(xì)的材料與方法);
3、SCI標(biāo)準(zhǔn)Result Figure。
六、服務(wù)項(xiàng)目說(shuō)明
1.實(shí)驗(yàn)周期:具體需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)情況而定。
2.對(duì)實(shí)驗(yàn)有特殊要求,請(qǐng)另詢價(jià)。
3.雙方簽訂合同后,收取50%首付后啟動(dòng)實(shí)驗(yàn)。