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科研小白如何摸索自己的預(yù)實(shí)驗(yàn)

無論是學(xué)術(shù)大牛還是科研小白,在接觸一個新課題時,往往是三個步驟:
首先,閱讀大量相關(guān)文獻(xiàn),設(shè)計(jì)出自己的實(shí)驗(yàn)方案。然后,摸索預(yù)實(shí)驗(yàn),獲得一些經(jīng)驗(yàn)和數(shù)據(jù)。最后,根據(jù)這些資料,決定是否推進(jìn)正式試驗(yàn)。
其中,很重要的預(yù)實(shí)驗(yàn)不僅能節(jié)約實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi),減少人力物力支出,最重要的是,能讓你在做正式試驗(yàn)時「手兒不抖,穩(wěn)如老狗」。
因此,今天上海東寰生物科技有限公司給大家分享一下如何摸索自己的預(yù)實(shí)驗(yàn)。
科研小白如何摸索自己的預(yù)實(shí)驗(yàn)

無論是學(xué)術(shù)大牛還是科研小白,在接觸一個新課題時,往往是三個步驟:

首先,閱讀大量相關(guān)文獻(xiàn),設(shè)計(jì)出自己的實(shí)驗(yàn)方案。然后,摸索預(yù)實(shí)驗(yàn),獲得一些經(jīng)驗(yàn)和數(shù)據(jù)。最后,根據(jù)這些資料,決定是否推進(jìn)正式試驗(yàn)。

其中,很重要的預(yù)實(shí)驗(yàn)不僅能節(jié)約實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi),減少人力物力支出,最重要的是,能讓你在做正式試驗(yàn)時「手兒不抖,穩(wěn)如老狗」。

因此,今天給大家分享一下如何摸索自己的預(yù)實(shí)驗(yàn)。

首先,預(yù)實(shí)驗(yàn)必須要當(dāng)做正式實(shí)驗(yàn)來對待(態(tài)度要放端正,這是必須的)。

預(yù)實(shí)驗(yàn)的每一步都需要詳細(xì)規(guī)劃,多方籌謀。不論是實(shí)驗(yàn)動物的選擇,還是檢測試劑的購買,都盡量和正式實(shí)驗(yàn)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。

建議大家先把所有試劑和藥物購買完畢后,再去購買實(shí)驗(yàn)動物。

因?yàn)閯游飼L胖,長胖后給藥劑量就要增加,不僅多花錢,并且還容易影響實(shí)驗(yàn)效果。

筆者曾經(jīng)提前將實(shí)驗(yàn)動物買回,但因?yàn)樘厥庠驔]能購買到造模藥物,最終只能忍痛割愛將動物贈送他人,白白虧了一筆血汗錢(那批老鼠在我這兒白吃白喝長得太胖,沒辦法用作造模)。

動物及試劑購買

首先需要考慮:實(shí)驗(yàn)動物品種、體重、性別、周齡(通常根據(jù)既往文獻(xiàn)報(bào)道可以獲得答案)、數(shù)量(需要考慮到實(shí)驗(yàn)有一定動物死亡率或者動物本身會打架互毆,因此需要提前購買足夠的動物)。

動物購買的途徑、安置的地點(diǎn),飲食管理(一般實(shí)驗(yàn)室會有動物房,也可以從其他地方購買),動物免疫證明、倫理證明需要提前準(zhǔn)備好。

實(shí)驗(yàn)相關(guān)的試劑和藥物:

比如造模藥物和器械,動物干預(yù)所需藥物,陽性藥物選擇及購買(有些藥物購買很困難,必須通過特殊程序才能買到)。如果涉及到有創(chuàng)操作,要提前準(zhǔn)備好麻醉藥物(麻藥建議提前購買),手術(shù)器械。

需要了解自身實(shí)驗(yàn)平臺能完成哪些技術(shù)(常見的有組織病理染色、Western Blot、PCR 等),實(shí)驗(yàn)儀器是否需要預(yù)約使用。

如果需要外送生物公司檢測,需要提前聯(lián)系好商家,以及了解清楚樣本如何獲取,如何運(yùn)輸。

飼養(yǎng)動物及干預(yù)

動物購買后需要將時間節(jié)點(diǎn)提前規(guī)劃好,比如,第一周需要做什么?測量體重?觀察飲食?測量需要的指標(biāo)?

中間有無特殊操作?比如灌胃、測量體重、做 CT 檢測、取血?……

第幾周取材?取材需要哪些組織?預(yù)實(shí)驗(yàn)方案就要提前設(shè)計(jì)清楚以上內(nèi)容。

取材及樣品準(zhǔn)備

取材需要提前到動物房禁食、稱體重、取出動物、手術(shù)器械的消毒、組織固定所需要的試劑和 EP 管,Western Blot 和 PCR 所需要的樣本儲存條件。

比如凍存管、EP 管,是否需要冰塊?是否需要液氮?取材當(dāng)天需要多少人?是否需要請人幫忙?

如果所需要取出的樣本較多,建議大家請人一起幫忙,流水線作業(yè),這樣能節(jié)省時間,并且能最大程度保證樣品的質(zhì)量。

如果請人,每個人需要負(fù)責(zé)哪一板塊的工作,比如誰負(fù)責(zé)麻醉,誰負(fù)責(zé)取血液,誰負(fù)責(zé)取器官,誰負(fù)責(zé)拍照、誰負(fù)責(zé)器官儲存,都需要提前規(guī)劃交代清楚。

實(shí)驗(yàn)指標(biāo)檢測

如果是需要自己做的檢測,比如常見的 Western Blot 、PCR,建議提前可以看看教程(無論是視頻還是貼吧,都要自己多方參考)。有了一定的理論基礎(chǔ)后,再向老師、師兄師姐學(xué)習(xí)經(jīng)驗(yàn)和技術(shù),如果實(shí)驗(yàn)平臺的儀器需要提前預(yù)約,建議提前規(guī)劃好使用的時間。

反復(fù)總結(jié)尋找答案

在整個預(yù)實(shí)驗(yàn)的過程中可能會出現(xiàn)很多問題。比如造模效果欠佳、灌胃操作不當(dāng)、腹腔注射操作失誤、麻醉藥物使用不當(dāng)?shù)纫饎游锼劳觥?/span>

每遇到問題都需要自己想辦法解決,可以從導(dǎo)師、師兄師姐、文獻(xiàn)、貼吧、視頻教程等找到答案。

比如筆者曾遇到同樣的麻醉藥物給藥,發(fā)現(xiàn)有的大鼠麻醉得很深,有的大鼠還活蹦亂跳,在反復(fù)嘗試調(diào)整麻藥濃度,給藥劑量,更換麻醉方式,后來才發(fā)現(xiàn)是動物體重秤的準(zhǔn)度有問題,導(dǎo)致體重秤得不準(zhǔn)。

因此,需要自己反復(fù)琢磨到底是實(shí)驗(yàn)過程中哪一個環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題,逐一排除。也要求在每一個實(shí)驗(yàn)步驟需要標(biāo)準(zhǔn)化,統(tǒng)一化,盡可能的排除干擾因素,這樣方便在遇到問題最快的找到答案。

同時,建議每日總結(jié),大到動物死亡原因分析,小到今日灌胃操作耗時多長時間。建議反復(fù)總結(jié)出每天實(shí)驗(yàn)的優(yōu)缺點(diǎn)。

做任何一個操作之前,建議提前腦海中反復(fù)模擬,準(zhǔn)備好相關(guān)工具和試劑,避免臨用之際缺槍少藥的,影響實(shí)驗(yàn)操作節(jié)奏和個人心情。

筆者曾經(jīng)灌胃操作的時候發(fā)現(xiàn)藥物竟然忘帶了,只好重新回實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)備,那真叫一個郁悶。

仔細(xì)記錄每日實(shí)驗(yàn)過程

無論是碩士還是博士,導(dǎo)師給我們上的第一堂課往往就是交代我們要詳細(xì)記好實(shí)驗(yàn)記錄,只要是和實(shí)驗(yàn)相關(guān)的,無論是照片,還是文字,必須要及時事無巨細(xì)地詳細(xì)記錄。并且要備份好每一份實(shí)驗(yàn)記錄。

我個人一般喜歡每天及時地記在「科研實(shí)驗(yàn)記錄本」上面,然后拍照掃描成電子版儲存在電腦和云端。

時間規(guī)劃

首先,個人是不贊同每天 24 小時泡在實(shí)驗(yàn)室的,高效率是關(guān)鍵。

建議提前一天規(guī)劃好第二天需要做的事情,按照代辦事項(xiàng)的格式逐條列出,哪一個時間段需要做什么事情?

這樣的好處有兩點(diǎn),一個是自己提前把時間預(yù)約好,可以留出足夠的時間休息和娛樂;另一個是在執(zhí)行計(jì)劃的時候往往會有一種時間緊迫感,辦事起來往往更高效且不會遺漏。


總之,預(yù)實(shí)驗(yàn)就是迷你版正式實(shí)驗(yàn),希望小伙伴們在進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)的時候一定要盡可能地準(zhǔn)備周全,這樣才能最快的推進(jìn)正式實(shí)驗(yàn)。