Q:pcr儀前面的循環(huán)用一個(gè)tm和后面的循環(huán)用另一個(gè)tm值這個(gè)叫什么呀?怎么設(shè)置呢這個(gè)
A1:一個(gè)是退火tm,一個(gè)是延伸tm,可以在pcr中進(jìn)行設(shè)置。
A2:叫梯度PCR,可以在儀器中找到TM設(shè)置,不同孔設(shè)置不同的tm值
A3:在PCR實(shí)驗(yàn)中,通常會(huì)使用兩個(gè)不同的溫度(Tm)值進(jìn)行循環(huán)。前面的循環(huán)稱(chēng)為退火(annealing)步驟,使用一個(gè)Tm值,而后面的循環(huán)稱(chēng)為延伸(extension)步驟,使用另一個(gè)Tm值。
設(shè)置PCR儀的溫度參數(shù)需要考慮目標(biāo)基因的特性和引物設(shè)計(jì)。通常,退火步驟的Tm值應(yīng)接近引物的退火溫度,以確保引物與目標(biāo)DNA序列的特異性結(jié)合。延伸步驟的Tm值應(yīng)略高于退火步驟的Tm值,以促進(jìn)擴(kuò)增產(chǎn)物的合成。