一、為什么細胞培養(yǎng)基有很多不同的名字?
培養(yǎng)基有很多不同的名字是因為根據(jù)不同細胞的培養(yǎng)和應用場景,培養(yǎng)基可以分為多種類型,最常見的是DMEM、RPMI-1640、MEM等。這些培養(yǎng)基有自己的配方特點和適用范圍。例如,DMEM適用于哺乳動物細胞的培養(yǎng),而RPMI-1640則適用于淋巴細胞的培養(yǎng)。
此外,還有一些專門用于特定類型細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基,如神經(jīng)元培養(yǎng)基、肌肉細胞培養(yǎng)基等。培養(yǎng)基是直接購買還是自己配制比較合適呢?我的建議是:常規(guī)的細胞培養(yǎng)直接采購商品化的培養(yǎng)基使用。
商品化的培養(yǎng)基通常以即用型的液體形式或粉劑形式提供。這種培養(yǎng)基通常用于常見的細胞培養(yǎng)實驗中,只要按照合適比例加入血清,就成為了完全培養(yǎng)基,就可以應用于細胞的日常培養(yǎng)、細胞增殖、細胞分化、細胞凋亡等實驗中。
剛才提到的DMEM、RPMI-1640、MEM等培養(yǎng)基經(jīng)常是以這種即用型的液體或粉劑形式提供給實驗操作者的。
此外,除了這些特定配方的即用型培養(yǎng)基意外,還有定制型的培養(yǎng)基,它是指需要根據(jù)特定的配方和比例來自行配制的培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基通常用于一些特殊的細胞培養(yǎng)實驗中,如原代細胞培養(yǎng)、干細胞培養(yǎng)等。需要配制的培養(yǎng)基通常包括無血清培養(yǎng)基、低血清培養(yǎng)基、添加了特殊因子的培養(yǎng)基等。這些就需要根據(jù)各自的特殊項目而制定針對性的培養(yǎng)條件了。
二、下面我們以實驗室最常見的DMEM和1640為例,來介紹它們之間的不同之處。
DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)是一種最廣泛應用的細胞培養(yǎng)基之一,它是由Eagle于1959年開發(fā)出來的,后由Dulbecco進行了改良。DMEM主要適用于肝臟、腎臟、肺、心臟等多種類型的哺乳動物細胞系的培養(yǎng)。DMEM中含有較高濃度的葡萄糖(4500mg/L)、氨基酸、維生素和微量元素等營養(yǎng)物質。
此外,DMEM還添加了丙酮酸和乳酸等緩沖劑,能夠保持細胞在較寬的pH范圍內(nèi)正常生長。
RPMI-1640(Roswell Park Memorial Institute medium 1640)是一種由Roswell Park紀念研究所開發(fā)的細胞培養(yǎng)基,適用于淋巴細胞、骨髓細胞、白血病細胞等多種類型的哺乳動物細胞系的培養(yǎng)。RPMI-1640中含有較低濃度的葡萄糖(2000mg/L)、氨基酸、維生素和微量元素等營養(yǎng)物質。
此外,RPMI-1640還添加了緩沖劑HEPES和碳酸氫鹽,能夠保持細胞在較窄的pH范圍內(nèi)正常生長。
DMEM和RPMI-1640在營養(yǎng)成分和緩沖劑的配比上有所不同,上述提到它們各自適合培養(yǎng)的細胞種類是經(jīng)過大量實驗驗證得到的結果,建議同學們遵照執(zhí)行即可。
但這也并不代表用錯了培養(yǎng)基細胞就一定會死掉,因為DMEM和1640只是在少數(shù)成分上做了針對優(yōu)化,對于大部分細胞株,即使用錯,也只是不那么合適而已。
三、購買回來的培養(yǎng)基應該如何儲存?
培養(yǎng)基是一種含有大量營養(yǎng)物質的復雜溶液,其成分非常容易受到環(huán)境的影響而發(fā)生變化。因此,在儲存和使用培養(yǎng)基時需要注意以下幾點:
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溫度:有條件的情況下,培養(yǎng)基應該儲存在4℃冰箱中,避免暴露在高溫環(huán)境中。此外,在使用前需要將培養(yǎng)基恢復到室溫。
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光照:培養(yǎng)基應該避免暴露在陽光下或強烈的熒光燈下,以免造成成分變化。
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消毒:在使用前需要對培養(yǎng)基進行消毒處理,以避免細菌和病毒污染。
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儲存時間:一般來說,開封后的培養(yǎng)基應該在一個月內(nèi)使用完畢,以避免成分變化造成影響。