無論是學術大牛還是科研小白，在接觸一個新課題時，往往是三個步驟：

首先，閱讀大量相關文獻，設計出自己的實驗方案。然后，摸索預實驗，獲得一些經(jīng)驗和數(shù)據(jù)。最后，根據(jù)這些資料，決定是否推進正式試驗。

其中，很重要的預實驗不僅能節(jié)約實驗經(jīng)費，減少人力物力支出，最重要的是，能讓你在做正式試驗時「手兒不抖，穩(wěn)如老狗」。

因此，今天給大家分享一下如何摸索自己的預實驗。

首先，預實驗必須要當做正式實驗來對待（態(tài)度要放端正，這是必須的）。

預實驗的每一步都需要詳細規(guī)劃，多方籌謀。不論是實驗動物的選擇，還是檢測試劑的購買，都盡量和正式實驗統(tǒng)一標準。

建議大家先把所有試劑和藥物購買完畢后，再去購買實驗動物。

因為動物會長胖，長胖后給藥劑量就要增加，不僅多花錢，并且還容易影響實驗效果。

筆者曾經(jīng)提前將實驗動物買回，但因為特殊原因沒能購買到造模藥物，最終只能忍痛割愛將動物贈送他人，白白虧了一筆血汗錢（那批老鼠在我這兒白吃白喝長得太胖，沒辦法用作造模）。

動物及試劑購買

首先需要考慮：實驗動物品種、體重、性別、周齡（通常根據(jù)既往文獻報道可以獲得答案）、數(shù)量（需要考慮到實驗有一定動物死亡率或者動物本身會打架互毆，因此需要提前購買足夠的動物）。

動物購買的途徑、安置的地點，飲食管理（一般實驗室會有動物房，也可以從其他地方購買），動物免疫證明、倫理證明需要提前準備好。

實驗相關的試劑和藥物：

比如造模藥物和器械，動物干預所需藥物，陽性藥物選擇及購買（有些藥物購買很困難，必須通過特殊程序才能買到）。如果涉及到有創(chuàng)操作，要提前準備好麻醉藥物（麻藥建議提前購買），手術器械。

需要了解自身實驗平臺能完成哪些技術（常見的有組織病理染色、Western Blot、PCR 等），實驗儀器是否需要預約使用。

如果需要外送生物公司檢測，需要提前聯(lián)系好商家，以及了解清楚樣本如何獲取，如何運輸。

飼養(yǎng)動物及干預

動物購買后需要將時間節(jié)點提前規(guī)劃好，比如，第一周需要做什么？測量體重？觀察飲食？測量需要的指標？

中間有無特殊操作？比如灌胃、測量體重、做 CT 檢測、取血？……

第幾周取材？取材需要哪些組織？預實驗方案就要提前設計清楚以上內(nèi)容。

取材及樣品準備

取材需要提前到動物房禁食、稱體重、取出動物、手術器械的消毒、組織固定所需要的試劑和 EP 管，Western Blot 和 PCR 所需要的樣本儲存條件。

比如凍存管、EP 管，是否需要冰塊？是否需要液氮？取材當天需要多少人？是否需要請人幫忙？

如果所需要取出的樣本較多，建議大家請人一起幫忙，流水線作業(yè)，這樣能節(jié)省時間，并且能最大程度保證樣品的質(zhì)量。

如果請人，每個人需要負責哪一板塊的工作，比如誰負責麻醉，誰負責取血液，誰負責取器官，誰負責拍照、誰負責器官儲存，都需要提前規(guī)劃交代清楚。

實驗指標檢測

如果是需要自己做的檢測，比如常見的 Western Blot 、PCR，建議提前可以看看教程（無論是視頻還是貼吧，都要自己多方參考）。有了一定的理論基礎后，再向老師、師兄師姐學習經(jīng)驗和技術，如果實驗平臺的儀器需要提前預約，建議提前規(guī)劃好使用的時間。

反復總結(jié)尋找答案

在整個預實驗的過程中可能會出現(xiàn)很多問題。比如造模效果欠佳、灌胃操作不當、腹腔注射操作失誤、麻醉藥物使用不當?shù)纫饎游锼劳觥?/span>

每遇到問題都需要自己想辦法解決，可以從導師、師兄師姐、文獻、貼吧、視頻教程等找到答案。

比如筆者曾遇到同樣的麻醉藥物給藥，發(fā)現(xiàn)有的大鼠麻醉得很深，有的大鼠還活蹦亂跳，在反復嘗試調(diào)整麻藥濃度，給藥劑量，更換麻醉方式，后來才發(fā)現(xiàn)是動物體重秤的準度有問題，導致體重秤得不準。

因此，需要自己反復琢磨到底是實驗過程中哪一個環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題，逐一排除。也要求在每一個實驗步驟需要標準化，統(tǒng)一化，盡可能的排除干擾因素，這樣方便在遇到問題最快的找到答案。

同時，建議每日總結(jié)，大到動物死亡原因分析，小到今日灌胃操作耗時多長時間。建議反復總結(jié)出每天實驗的優(yōu)缺點。

做任何一個操作之前，建議提前腦海中反復模擬，準備好相關工具和試劑，避免臨用之際缺槍少藥的，影響實驗操作節(jié)奏和個人心情。

筆者曾經(jīng)灌胃操作的時候發(fā)現(xiàn)藥物竟然忘帶了，只好重新回實驗室準備，那真叫一個郁悶。

仔細記錄每日實驗過程

無論是碩士還是博士，導師給我們上的第一堂課往往就是交代我們要詳細記好實驗記錄，只要是和實驗相關的，無論是照片，還是文字，必須要及時事無巨細地詳細記錄。并且要備份好每一份實驗記錄。

我個人一般喜歡每天及時地記在「科研實驗記錄本」上面，然后拍照掃描成電子版儲存在電腦和云端。

時間規(guī)劃

首先，個人是不贊同每天 24 小時泡在實驗室的，高效率是關鍵。

建議提前一天規(guī)劃好第二天需要做的事情，按照代辦事項的格式逐條列出，哪一個時間段需要做什么事情？

這樣的好處有兩點，一個是自己提前把時間預約好，可以留出足夠的時間休息和娛樂；另一個是在執(zhí)行計劃的時候往往會有一種時間緊迫感，辦事起來往往更高效且不會遺漏。

總之，預實驗就是迷你版正式實驗，希望小伙伴們在進行預實驗的時候一定要盡可能地準備周全，這樣才能最快的推進正式實驗。