流式細(xì)胞周期檢測試劑盒 《紅色熒光》
產(chǎn)品編號: C01302
產(chǎn)品包裝: 100 T
細(xì)胞周期一共分為四個階段:G1 期,S 期,G2 期,M 期。細(xì)胞傳代經(jīng)歷了整個細(xì)胞周期:DNA 復(fù)制是在 S 期完成,細(xì)胞二分裂是在 M 期完成,G0/G1 期和 G2 期是為 DNA 復(fù)制和細(xì)胞分裂提供足夠的時間,蛋白,細(xì)胞器等。
適合于流式細(xì)胞檢測熒光法細(xì)胞周期檢測試劑盒 《紅色熒光》是設(shè)計用來檢測細(xì)胞周期進(jìn)程和增殖的,在活細(xì)胞、經(jīng)通透性處理的細(xì)胞和固定化細(xì)胞中使用我們獨特的 Nuclear GreenTM LCS1 對細(xì)胞周期進(jìn)程和增殖進(jìn)行監(jiān)測。在所給樣品的不同細(xì)胞中,有 G0/G1, S 和 G2/M 期以及細(xì)胞凋亡之前的亞-G1 期等,可以通過流式細(xì)胞儀檢測。經(jīng)過 Nuclear Green LC1 染色的細(xì)胞可以通過流式細(xì)胞儀在 Ex/Em = 490 nm/520 nm(FL1 通道)進(jìn)行檢測。
組分 |
100T |
組分 A: 200 ×Nuclear GreenTM LCS1 |
250 μL |
組分 B: Assay Buffer |
50 mL |
說明書 1
建議在低于-15℃下冷凍保存,要求儲存環(huán)境干燥并避免光照。
注意:使用前,請將該試劑盒的所有組份在室溫解凍。
· 樣品的準(zhǔn)備:用預(yù)熱的培養(yǎng)基或緩沖液調(diào)整細(xì)胞濃度為 5-10×105 cells/mL,0.5 ml/管;
注意:. 每個細(xì)胞系均需要依據(jù)自身特性確定其最佳細(xì)胞密度。具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定。
· 藥物處理:根據(jù)藥物待檢藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、增殖的快慢,實驗?zāi)康牡扔绊懸蛩囟鴽Q定藥物處理的時間;
· 加入 2.5 μL 200×Nuclear GreenTM LCS1 (組分 A),37°C, 5% CO2 培養(yǎng)箱孵育 30-60 min;
注意:對于貼壁細(xì)胞,為保證細(xì)胞的完成性,可以用含有 0.5 mM EDTA 的胰酶消化,并用含有血清的培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞,然后再與Nuclear Green LCS1 染色孵育;染色孵育的時間與細(xì)胞的類型,細(xì)胞濃度,實驗?zāi)康牡纫蛩赜嘘P(guān);在 DNA 染色之前,不需要固定細(xì)胞,因為 Nuclear GreenTMLCS1 可以滲透到細(xì)胞內(nèi)。
· 選做:1000rpm,4 min,離心;然后用 0.5 ml Assay buffer (組分 B)或者自己選擇的緩沖液重懸細(xì)胞。
· 使用流式細(xì)胞儀檢測熒光強(qiáng)度,Ex/Em = 490/525 nm(FL1 channel1)。