兔輸尿管上皮細(xì)胞的分離培養(yǎng)及鑒定

【簡(jiǎn)介】

上皮細(xì)胞覆蓋于身體表面并襯貼于體內(nèi)空腔器官腔面的細(xì)胞，上皮細(xì)胞具有強(qiáng)大的角生和更新能力。上皮組織具有保護(hù)、吸收、分泌和排泄等作用。當(dāng)上皮細(xì)胞受損時(shí)，則影響機(jī)體的防御功能；胰腺的內(nèi)分泌物主要有胰島素、胰高血糖素、胃泌素及生長抑素等，與機(jī)體內(nèi)的營養(yǎng)代謝及調(diào)節(jié)有關(guān)；

【材料】

3-8周齡兔、手術(shù)剪、手術(shù)鑷、75%酒精、雙抗、PBS、FBS、培養(yǎng)皿、15ml離心管、上皮專用培養(yǎng)液；

【方法】

1）空氣栓塞處死，將輸尿管組織迅速從取出，置于平皿中PBS浸泡；

2）將輸尿管組織翻過來，兩端結(jié)扎，PBS清洗；

3）將組織貼盤，2h后加入上皮專用培養(yǎng)液；

4）細(xì)胞2-3d后爬出；

【培養(yǎng)】

上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)液；

【鑒定】

1）免疫熒光

陽性：角蛋白18（Cytokeratin 18）

陰性：vimentin